• 处理养殖废水微生物制剂制备方法

处理养殖废水微生物制剂制备方法

所属分类: 养殖废水处理 | 发布日期:2020-01-17 10:01:14

摘要 本发明公开了一种制备微生物制剂养殖废水处理,属于环保领域的方法。本发明以蛋白质-核球菌和光合细菌为原料驯化蛋白质和小藻,使它们具有较强的抗污染和去除污染的能力,小藻能有效地吸收培养水中的氮磷...

产品详情

摘要

本发明公开了一种制备微生物制剂养殖废水处理,属于环保领域的方法。本发明以蛋白质-核球菌和光合细菌为原料驯化蛋白质和小藻,使它们具有较强的抗污染和去除污染的能力,小藻能有效地吸收培养水中的氮磷营养物质,从而改善培养环境,减少培养密度的限制。本发明解决了水体中污水处理效率低,分散群落稳定性低的问题。

权利要求书

1. 一种用于处理水产养殖废水的微生物制剂的制备方法,其特征在于,该制备方法包括以下步骤:

(1)将土壤按质量比1:150~200加入富集培养基中,培养基在180r/min,25~30°C培养,培养基按25%接种到富集培养基上,一级培养基按25~30°C培养,一级培养基按15%接种到富集培养基上,二级培养基按25~30°C接种到富集培养基上,二级培养基按10%接种到富集培养基上,驯化;

(2)将混合液按1∶9的质量比与生理盐水混合,然后将混合液稀释至10-6的稀释水平,得到稀释液,将稀释液涂在纯化培养基上,然后在25~30C培养稀释液,将最大的菌落线接种到纯化培养基上,纯化菌落2~3次。

(3)取土壤按质量2:5加入蒸馏水,于95~100℃搅拌混合,冷却至室温,取上清液,取球藻培养基按质量比10:3加入上清液,灭菌,得灭菌物,取蛋白核小球藻按5%的接种量接种至灭菌物中,于25~28℃光照培养,得培养物a,取氯化铵按质量比5:1:5加入硝酸钠、磷酸氢二钾混合,得混合添加物,取培养物按质量比5:100~200:0.2~0.3加入灭菌物、混合添加物,于25~28℃光照培养,得初级驯化培养物,取氯化铵按质量比20:1:5加入硝酸钠、磷酸氢二钾混合,得混合添加物a,取初级驯化培养物按质量比6:150~250:0.4~0.6加入灭菌物、混合添加物a,于25~28℃光照培养,得二级驯化培养物,离心和沉淀a;

(4)取沼泽红假单胞菌由4接种到接种物与活化的介质的7%,在28〜33℃光照培养,得到活化的培养物离心,将沉淀物B,比由析出物2的质量:1个混合物B沉淀加入,干燥,粉碎,过100目筛,过筛,收集混合的颗粒;

(5)将来自步骤(2)的2交替干燥质量比的溶液中加入1个颗粒在混合碗中混合,将所得混合物溶于1海藻酸钠质量比在60〜80 5〜7去离子水℃搅拌混合的混合物中加入藻酸钠质量2〜4次,搅拌和混合,将混合物搅拌,得到,取6%的氯化钙溶液的质量分数滴加到搅拌的混合物中逐滴加入到该控制时间20〜30分钟到25〜30℃搅拌混合物,使其静置,挤压造粒机,以得到微生物剂。

2.根据权利要求养殖废水处理,其中所述步骤(1)制备的微生物制剂的方法,是在通过基于质量富集培养基份,以1至4份硫酸铵,20至25份琥珀酸钠,2.5〜4份的磷酸氢二钾,1〜3重量份的硫酸镁,2至4份的氯化钠,0.003至0.006份硫酸亚铁,硫酸锰,0.003〜0.007份,1000份水,121℃灭菌20分钟。

3.相同富集培养基其它组分,20至25份的琼脂混合,即:根据权利要求养殖废水处理,其特征在于,所述步骤(2)纯化介质中制备的微生物制剂的方法。

4.根据权利要求1所述的处理养殖废水的微生物制剂的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中球藻培养基:按质量份数计,取10~15份硝酸钠、3~5份磷酸氢二钾、3~5份七水合硫酸镁、1~3份二水氯化钙、10~13份磷酸二氢钾、1~3份氯化钠、0.003~0.07份六水氯化铁、2~4份乙二胺四乙酸铁钠、2~5份混合溶液、1000份蒸馏水,调节pH至6.8~7.2,121℃灭菌20min,即得。

5.根据权利要求4所述的处理养殖废水的微生物制剂的制备方法,其特征在于,所述乙二胺四乙酸铁钠:取质量分数为20%的盐酸按质量比10~20:1~3加入六水氯化铁搅拌混合20~30min,得搅拌混合物,取搅拌混合物按质量比10:40~50:1加入EDTA二钠、蒸馏水混合,即得乙二胺四乙酸铁钠;混合溶液:按质量份数计,取0.2~0.4份硼酸、0.1~0.3份四水合氯化锰、0.02~0.04份七水合硫酸锌、0.003~0.005份(NH4)6Mo7O24·4H2O、0.005~0.008份CuSO4·5H2O、100份水混合,即得混合溶液。

6.根据权利要求1所述的处理养殖废水的微生物制剂的制备方法,其特征在于,所述步骤(4)中活化培养基:按质量份数计,取1~3份NH4 Cl、3~5份CH3COONa、20~25份MgCl2、0.1~0.3份CaCl2、0.4~0.8份KH2PO4 、0.3~0.5份K2HPO4、0.1~0.4份酵母膏、1000份蒸馏水,pH 7.2±0.1,121℃灭菌20min,即得。

说明书

处理养殖废水微生物制剂制备方法

技术领域

本发明属于对环境保护的领域,尤其涉及一种处理养殖废水微生物制剂制备方法。

背景技术

随着我们的家畜,我们家禽,猪肉的迅速发展,产蛋量持续增加,规模化养殖场可以降低成本,农场,增加收入。但是,大型养殖场也造成肥料的过度集中,因此承受着巨大的压力养殖场周边环境。污水污染状况十分严重。 如何有效地处理废水,避免废水排放对水和土壤的污染,已成为一个迫切需要解决的问题。

农场废水的主要来源:粪便浸出,场地冲洗水和尿液..其特点是成分复杂,有机物浓度和氨氮浓度都很高,而且含有一定的抗生素和重金属。现有的方法是对养殖用水进行简单沉淀后再直接进行微生物净化,然后直接送回池塘进行养殖,以微生物为主体的生物修复技术在水产养殖水质控制上的应用非常广泛。有微生态养殖水域构成的微生物多样性,在大多数情况下,养殖水体的自然条件不能完全满足生物修复,或天然生物修复效率的要求,速度太低。投加外源微生物是优化微生态系统的重要途径,它一方面可以调节生物降解微生态系统中微生物种群和群落的相互作用,另一方面可以提高微生态系统中微生物浓度和代谢活性。但实际净化效果不理想,水体中分散群落的稳定性不高..因此,为解决上述问题,提供一种处理水产养殖废水的微生物制剂显得尤为重要。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对养殖废水处理效率低,分散群落在水体中稳定性低的特点,提供一种处理养殖废水的微生物制备方法..

为解决技术问题,本发明采用以下技术方案:

一种用于处理水产养殖废水的微生物制剂的制备方法,其特征在于,该制备方法包括以下步骤:

(1)将土壤按质量比1:150~200加入富集培养基中,培养基在180r/min,25~30°C培养,培养基按25%接种到富集培养基上,一级培养基按25~30°C培养,一级培养基按15%接种到富集培养基上,二级培养基按25~30°C接种到富集培养基上,二级培养基按10%接种到富集培养基上,驯化;

(2)将混合液按1∶9的质量比与生理盐水混合,然后将混合液稀释至10-6的稀释水平,得到稀释液,将稀释液涂在纯化培养基上,然后在25~30C培养稀释液,将最大的菌落线接种到纯化培养基上,纯化菌落2~3次。

(3)取土壤按质量2:5加入蒸馏水,于95~100℃搅拌混合,冷却至室温,取上清液,取球藻培养基按质量比10:3加入上清液,灭菌,得灭菌物,取蛋白核小球藻按5%的接种量接种至灭菌物中,于25~28℃光照培养,得培养物a,取氯化铵按质量比5:1:5加入硝酸钠、磷酸氢二钾混合,得混合添加物,取培养物按质量比5:100~200:0.2~0.3加入灭菌物、混合添加物,于25~28℃光照培养,得初级驯化培养物,取氯化铵按质量比20:1:5加入硝酸钠、磷酸氢二钾混合,得混合添加物a,取初级驯化培养物按质量比6:150~250:0.4~0.6加入灭菌物、混合添加物a,于25~28℃光照培养,得二级驯化培养物,离心和沉淀a;

(4)取沼泽红假单胞菌由4接种到接种物与活化的介质的7%,在28〜33℃光照培养,得到活化的培养物离心,将沉淀物B,比由析出物2的质量:1个混合物B沉淀加入,干燥,粉碎,过100目筛,过筛,收集混合的颗粒;

(5)将来自步骤(2)的2交替干燥质量比的溶液中加入1个颗粒在混合碗中混合,将所得混合物溶于1海藻酸钠质量比在60〜80 5〜7去离子水℃搅拌混合的混合物中加入藻酸钠质量2〜4次,搅拌和混合,将混合物搅拌,得到,取6%的氯化钙溶液的质量分数滴加到搅拌的混合物中逐滴加入到该控制时间20〜30分钟到25〜30℃搅拌混合物,使其静置,挤压造粒机,以得到微生物剂。

富集培养基:按质量份数计,取4份硫酸铵、25份丁二酸钠、4份磷酸氢二钾、3份硫酸镁、4份氯化钠、0.006份硫酸铁、0.007份硫酸锰、1000份水,121℃灭菌20min。

纯化培养基:富集培养基其他组分不变,加入25份琼脂混合,即得。

球藻培养基:按质量份数计,取15份硝酸钠、5份磷酸氢二钾、5份七水合硫酸镁、3份二水氯化钙、13份磷酸二氢钾、3份氯化钠、0.07份六水氯化铁、4份乙二胺四乙酸铁钠、5份混合溶液、1000份蒸馏水,调节pH至7.2,121℃灭菌20min,即得。

所述乙二胺四乙酸铁钠:取质量分数为20%的盐酸按质量比10~20:1~3加入六水氯化铁搅拌混合20~30min,得搅拌混合物,取搅拌混合物按质量比10:40~50:1加入EDTA二钠、蒸馏水混合,即得乙二胺四乙酸铁钠;混合溶液:按质量份数计,取0.2~0.4份硼酸、0.1~0.3份四水合氯化锰、0.02~0.04份七水合硫酸锌、0.003~0.005份(NH4)6Mo7O24·4H2O、0.005~0.008份CuSO4·5H2O、100份水混合,即得混合溶液。

所述步骤(4)中活化培养基:按质量份数计,取1~3份NH4 Cl、3~5份CH3COONa、20~25份MgCl2、0.1~0.3份CaCl2、0.4~0.8份KH2PO4 、0.3~0.5份K2HPO4、0.1~0.4份酵母膏、1000份蒸馏水,pH 7.2±0.1,121℃灭菌20min,即得。

与本发明的其它方法相比是有利的技术效果:

(1)本发明微生物在有氧的条件下将氨氮氧化为亚硝酸盐氮,再进一步氧化为硝酸盐氮,而自养硝化菌增长速度比较缓慢,对环境条件要求严格,其最佳温度为 35~42℃,在低温时(尤其是冬季)硝化速率低,硝化过程需要较高的溶解氧浓度(>3 mg/L),中性偏碱(7.0~8.0)的pH条件以及非常低的C/N值,为了提高硝化速率与自养硝化菌相比,异养硝化菌具有生长速度快,环境适应能力强等特点,从土壤中筛选具有高脱氮能力的异养硝化菌,加入丁二酸钠为唯一碳源,加入培养过程中废水中的铵盐没有被氧化成亚硝酸盐和硝酸盐,而是大部分被转化成了菌体内的胞内氮,在实际的污水处理过程中,这部分的氮将转移至剩余污泥中,从而提高了剩余污泥中氮的含量及肥效,利用农场污水处理产生的污泥经过堆肥等工艺有利于农作物肥料的开发利用

(2)本发明以蛋白核小球藻、光合细菌为原料,对蛋白核小球藻进行驯化,使其具有较强的耐污、去污能力,小球藻能够有效吸收养殖水体中的氮、磷营养物质,从而起到改善养殖环境,减小养殖密度的制约作用,将其与光合细菌混合,光合细菌在养殖水中直接消解有机质和硫化氢生长繁殖,水体得到了净化,藻类在新陈代谢过程中通过微藻生长繁殖改变了废水的物化性质,如废水中pH值升高,会使磷酸盐形成沉淀及NH3挥发,间接的去除了废水中的氮磷,微藻通过细胞壁和细胞膜上的脂质将大量有机物吸收,然后将其降解为小分子物质,这些物质可以被周围的细菌利用,细菌也会向周围环境释放酶类、维生素、糖肽类物质可以促进藻类的生长,治理养殖废水时,在细菌的作用下,含碳有机物分解为 co2和 h2o,含磷有机物分解为正磷酸盐,含氮有机物氨酸盐或硝酸盐分解为硝酸盐、亚硝酸盐和氨氮,这些小分子为藻类提供碳、氮和磷,藻类通过这些碳、氮和磷的代谢产生自己的细胞组分。 藻类通过光合作用释放氧气,增加了水环境中的氧气量,也为一些需氧细菌的代谢提供了良好的水环境

  (3)本发明利用海藻酸钠和氯化钙细菌细胞颗粒进行固定化,对氮磷的去除效果较好,除吸附溶液挥发和包埋载体外,主要是由于颗粒内部具有多孔和间隙结构,为微藻和细菌提供了良好的生长繁殖条件,为藻类和底物的接触提供了较大的比表面积。养殖废水与小球内部微藻和真菌细胞接触面积越大,越容易将各种营养物质固定到固定化细菌细胞小球内部,氮磷去除效率也大大提高..

具体实施方式

土壤:从海岛舟山市志鞍村采取的土壤。

富集培养基:按质量份数计,取4份硫酸铵、25份丁二酸钠、4份磷酸氢二钾、3份硫酸镁、4份氯化钠、0.006份硫酸铁、0.007份硫酸锰、1000份水,121℃灭菌20min。

纯化培养基:富集培养基其他组分不变,加入25份琼脂混合,即得。

球藻培养基:按质量份数计,取15份硝酸钠、5份磷酸氢二钾、5份七水合硫酸镁、3份二水氯化钙、13份磷酸二氢钾、3份氯化钠、0.07份六水氯化铁、4份乙二胺四乙酸铁钠、5份混合溶液、1000份蒸馏水,调节pH至7.2,121℃灭菌20min,即得。

乙二胺四乙酸铁钠:取质量分数为20%的盐酸按质量比20:3加入六水氯化铁搅拌混合30min,得搅拌混合物,取搅拌混合物按质量比10:50:1加入EDTA二钠、蒸馏水混合,即得乙二胺四乙酸铁钠。

混合溶液:按质量份数计,取0.2~0.4份硼酸、0.1~0.3份四水合氯化锰、0.02~0.04份七水合硫酸锌、0.003~0.005份(NH4)6Mo7O24·4H2O、0.005~0.008份CuSO4·5H2O、100份水混合,即得混合溶液。

活化培养基:按质量份数计,取1~3份NH4 Cl、3~5份CH3COONa、20~25份MgCl2、0.1~0.3份CaCl2、0.4~0.8份KH2PO4 、0.3~0.5份K2HPO4、0.1~0.4份酵母膏、1000份蒸馏水,pH 7.2±0.1,121℃灭菌20min,即得。

制备养殖废水处理微生物制剂的方法,该方法包括以下步骤:

(1)取土壤按质量比1:150~200加入富集培养基,于180r/min、25~30℃培养2~3天,得培养物,取培养物按25%的接种量接种至富集培养基中,于25~30℃培养2~3天,得一级培养物,取一级培养物按15%的接种量接种至富集培养基中,于25~30℃培养物2~3天,得二级培养物,取二级培养物按10%的接种量接种至富集培养基中,于25~30℃培养物2~3天,得驯化培养物;

       (2)按1:9的质量比将混合液与生理盐水混合,得到混合液,稀释液稀释至10-6的稀释水平,得到稀释液,将稀释液涂在25~30°C的纯化培养基上2~3天,将最大直径的菌落接种到纯化培养基上,纯化2~3次,将菌落接种到富集培养基上,接种到25~30h的培养基上。

       (3)取纯化菌落接种至富集培养基中,于30℃培养24h,离心,取沉淀,冷冻干燥,得干燥物,备用;(3)取土壤按质量2:5加入蒸馏水,于100℃搅拌混合3h,冷却至室温,取上清液,取球藻培养基按质量比10:3加入上清液,121℃灭菌20min,得灭菌物,取蛋白核小球藻按5%的接种量接种至灭菌物中,于28℃光照培养2天,得培养物a,取氯化铵按质量比5:1:5加入硝酸钠、磷酸氢二钾混合,得混合添加物,取培养物按质量比5:200:0.3加入灭菌物、混合添加物,于28℃光照培养2天,得初级驯化培养物,取氯化铵按质量比20:1:5加入硝酸钠、磷酸氢二钾混合,得混合添加物a,取初级驯化培养物按质量比6:250:0.6加入灭菌物、混合添加物a,在25〜28℃为光1〜2天,得到两种驯化培养物离心,将沉淀物A;

        (4)取沼泽红假单胞菌激活介质中接种到4〜7%的接种量,光的28〜33℃2-3天培养,得到活化的培养物离心,将沉淀物B,该沉淀物的质量比2:1的溶液中加入的混合沉淀物b,干燥,粉碎,筛分通过100目筛,过筛,收集混合的颗粒;

        ( 5 )采取步骤(2)将预留干物质以2:1的质量比通过筛子加入混合物中,得到混合物,加入质量比为1:5ー7的去离子水制成海藻酸钠,在60ー80 °c 的温度下混合30ー40分钟, 加入2 ~ 4倍量海藻酸钠混合物,搅拌1 ~ 2h,然后加入6% 量的氯化钙溶液,控制滴加时间20 ~ 30min,在25 ~ 30c 下搅拌30 ~ 40min,静置1 ~ 2h 后压制颗粒制备微生物制剂。

土壤:从海岛舟山市志鞍村采取的土壤。

富集培养基:按质量份数计,取3份硫酸铵、23份丁二酸钠、3份磷酸氢二钾、2份硫酸镁、3份氯化钠、0.004份硫酸铁、0.005份硫酸锰、1000份水,121℃灭菌20min。

纯化培养基:富集培养基其他组分不变,加入20~25份琼脂混合,即得。

球藻培养基:按质量份数计,取13份硝酸钠、4份磷酸氢二钾、4份七水合硫酸镁、2份二水氯化钙、12份磷酸二氢钾、2份氯化钠、0.05份六水氯化铁、3份乙二胺四乙酸铁钠、3份混合溶液、1000份蒸馏水,调节pH至7,121℃灭菌20min,即得。

乙二胺四乙酸铁钠:取质量分数为20%的盐酸按质量比10~20:1~3加入六水氯化铁搅拌混合20~30min,得搅拌混合物,取搅拌混合物按质量比10:40~50:1加入EDTA二钠、蒸馏水混合,即得乙二胺四乙酸铁钠。

混合溶液:按质量份数计,取0.2份硼酸、0.1份四水合氯化锰、0.02份七水合硫酸锌、0.003份(NH4)6Mo7O24·4H2O、0.005份CuSO4·5H2O、100份水混合,即得混合溶液。

活化培养基:按质量份数计,取1份NH4 Cl、3份CH3COONa、20份MgCl2、0.1份CaCl2、0.4份KH2PO4 、0.3份K2HPO4、0.1份酵母膏、1000份蒸馏水,pH 7.1,121℃灭菌20min,即得。

制备养殖废水处理微生物制剂的方法,该方法包括以下步骤:

( 1 )在培养基中加入1:150土壤,质量比为180r / min 和25c,培养2d,接种培养基,25% 接种量接种培养基,25c 培养2d,得到初代培养,15% 接种量接种到培养基中,25c 接种10% 接种量接种培养基2d,培养基驯化

(2)取培养物适应质量比的溶液中加入9生理盐水混合以获得混合物,将混合物稀释至稀释阶段采取,得到10-6稀释,稀释液施加到乘坐纯化介质在25℃保温2天,最大直径拾取细菌菌落进行纯化划线培养基,重复划线两次,在25纯化,得到菌落,纯化的菌落采取富集培养基,18小时℃,离心分离,收集沉淀物,冷冻干燥,以获得用于稍后使用干燥

(3)取土壤按质量2:5加入蒸馏水,于95℃搅拌混合2h,冷却至室温,取上清液,取球藻培养基按质量比10:3加入上清液,121℃灭菌20min,得灭菌物,取蛋白核小球藻按5%的接种量接种至灭菌物中,于25℃光照培养1天,得培养物a,取氯化铵按质量比5:1:5加入硝酸钠、磷酸氢二钾混合,得混合添加物,取培养物按质量比5:100:0.2加入灭菌物、混合添加物,于25℃光照培养1天,得初级驯化培养物,取氯化铵按质量比20:1:5加入硝酸钠、磷酸氢二钾混合,得混合添加物a,取初级驯化培养物按质量比6:150:0.4加入灭菌物、混合添加物a,于25℃光照培养1天,得二级驯化培养物,离心,取沉淀a;

(4)将大沼泽地假单胞菌按接种量的4%接种到活化培养基中,在28°C培养2天,得到活化培养物,离心,沉淀b,沉淀a加入沉淀b,质量比2:1,干燥,粉碎,过100目筛,收集混合筛颗粒;

(5)采取步骤(2)按质量比2:1将混合液加入混合物中,然后按质量比1:5加入去离子水,然后在60°C下混合30分钟,然后加入2倍于海藻酸钠质量的混合物,然后混合1小时,然后将6%氯化钙溶液混合到混合物中,控制时间20分钟,在25°C下混合30分钟,留出1h,得到球团微生物。

土壤:从海岛舟山市志鞍村采取的土壤。

富集培养基:按质量份数计,取3份硫酸铵、23份丁二酸钠、3份磷酸氢二钾、2份硫酸镁、3份氯化钠、0.004份硫酸铁、0.005份硫酸锰、1000份水,121℃灭菌20min。

纯化培养基:富集培养基其他组分不变,加入20~25份琼脂混合,即得。

球藻培养基:按质量份数计,取13份硝酸钠、4份磷酸氢二钾、4份七水合硫酸镁、2份二水氯化钙、12份磷酸二氢钾、2份氯化钠、0.05份六水氯化铁、3份乙二胺四乙酸铁钠、3份混合溶液、1000份蒸馏水,调节pH至7,121℃灭菌20min,即得。

乙二胺四乙酸铁钠:取质量分数为20%的盐酸按质量比10~20:1~3加入六水氯化铁搅拌混合20~30min,得搅拌混合物,取搅拌混合物按质量比10:40~50:1加入EDTA二钠、蒸馏水混合,即得乙二胺四乙酸铁钠。

混合溶液:按质量份数计,取0.4份硼酸、0.3份四水合氯化锰、0.04份七水合硫酸锌、0.005份(NH4)6Mo7O24·4H2O、0.008份CuSO4·5H2O、100份水混合,即得混合溶液。

活化培养基:按质量份数计,取3份NH4 Cl、5份CH3COONa、25份MgCl2、0.3份CaCl2、0.8份KH2PO4 、0.5份K2HPO4、0.4份酵母膏、1000份蒸馏水,pH 7.3,121℃灭菌20min,即得。

制备养殖废水处理微生物制剂的方法,该方法包括以下步骤:

(1)将土壤按质量比1:200加入富集培养基中,在180r/min和30°C培养3天。培养基接种25%接种至富集培养基..一级培养接种15%接种至富集培养基3d,二级培养接种10%接种至富集培养基,一级培养驯化30°C培养3d..

 ( 2 )驯化培养物与生理盐水按1:9的质量比混合,将混合液稀释至10-6的稀释度,将稀释液涂于纯化培养基上,30 °c 培养3天,挑出直径最大的菌落,将其置于纯化培养基中,重复3次得到菌落,将纯化菌落置于纯化培养基中,30 °c 培 养24小时,离心沉淀,冷冻干燥,得到干物,保存;

(3)取土壤按质量2:5加入蒸馏水,于100℃搅拌混合3h,冷却至室温,取上清液,取球藻培养基按质量比10:3加入上清液,121℃灭菌20min,得灭菌物,取蛋白核小球藻按5%的接种量接种至灭菌物中,于28℃光照培养2天,得培养物a,取氯化铵按质量比5:1:5加入硝酸钠、磷酸氢二钾混合,得混合添加物,取培养物按质量比5:200:0.3加入灭菌物、混合添加物,于28℃光照培养2天,得初级驯化培养物,取氯化铵按质量比20:1:5加入硝酸钠、磷酸氢二钾混合,得混合添加物a,取初级驯化培养物按质量比6:250:0.6加入灭菌物、混合添加物a,于28℃光照培养2天,得二级驯化培养物,离心,取沉淀a;

(4)取为7%沼泽红假单胞菌接种到活化的介质,在33℃的光进行3天,得到活化的培养物离心,将沉淀物B,该沉淀物的质量比2:将沉淀的混合物中加入1b中,干燥,粉碎,过100目筛,过筛,收集混合的颗粒过筛;

(5)将来自步骤(2)交替干燥质量的2比的溶液中加入1个颗粒在混合碗中混合,将所得混合物溶于海藻酸钠质量比1:溶液中加入7去离子水,混合物在80℃下搅拌。 ]ç40分钟,将混合物进一步加入海藻酸钠4倍质量,搅拌和混合2小时,将混合物搅拌,得到,取6%的氯化钙溶液的质量分数滴加到搅拌的混合物中逐滴的控制中加入时间30min,在30℃下搅拌混合。]ç40分钟,放置2小时,挤压造粒机,以得到微生物剂。

土壤:从海岛舟山市志鞍村采取的土壤。

富集培养基:按质量份数计,取4份硫酸铵、25份丁二酸钠、4份磷酸氢二钾、3份硫酸镁、4份氯化钠、0.006份硫酸铁、0.007份硫酸锰、1000份水,121℃灭菌20min。

纯化培养基:富集培养基其他组分不变,加入20~25份琼脂混合,即得。

球藻培养基:按质量份数计,取15份硝酸钠、5份磷酸氢二钾、5份七水合硫酸镁、3份二水氯化钙、13份磷酸二氢钾、3份氯化钠、0.07份六水氯化铁、4份乙二胺四乙酸铁钠、5份混合溶液、1000份蒸馏水,调节pH至7.2,121℃灭菌20min,即得。

乙二胺四乙酸铁钠:取质量分数为20%的盐酸按质量比10~20:1~3加入六水氯化铁搅拌混合20~30min,得搅拌混合物,取搅拌混合物按质量比10:40~50:1加入EDTA二钠、蒸馏水混合,即得乙二胺四乙酸铁钠。

混合溶液:按质量份数计,取0.3份硼酸、0.2份四水合氯化锰、0.03份七水合硫酸锌、0.004份(NH4)6Mo7O24·4H2O、0.007份CuSO4·5H2O、100份水混合,即得混合溶液。

活化培养基:按质量份数计,取2份NH4 Cl、4份CH3COONa、23份MgCl2、0.2份CaCl2、0.6份KH2PO4 、0.4份K2HPO4、0.3份酵母膏、1000份蒸馏水,pH 7.2,121℃灭菌20min,即得。

制备养殖废水处理微生物制剂的方法,该方法包括以下步骤:

(1)将土壤按1:175的质量比加入富集培养基中,在180r/min和27°C培养2天。培养基接种25%接种至富集培养基,一级培养27°C培养2天。

(2)将混合液按质量比1:9与生理盐水混合,然后将混合液稀释至10-6的稀释水平,得到稀释剂,将稀释剂涂布在纯化培养基上,然后在27°C培养2天。

(3)取土壤按质量2:5加入蒸馏水,于97℃搅拌混合2h,冷却至室温,取上清液,取球藻培养基按质量比10:3加入上清液,121℃灭菌20min,得灭菌物,取蛋白核小球藻按5%的接种量接种至灭菌物中,于27℃光照培养1天,得培养物a,取氯化铵按质量比5:1:5加入硝酸钠、磷酸氢二钾混合,得混合添加物,取培养物按质量比5:150:0.2加入灭菌物、混合添加物,于27℃光照培养1天,得初级驯化培养物,取氯化铵按质量比20:1:5加入硝酸钠、磷酸氢二钾混合,得混合添加物a,取初级驯化培养物按质量比6:200:0.5加入灭菌物、混合添加物a,于27℃光照培养1天,得二级驯化培养物,离心,取沉淀a;

(4)将大沼泽地假单胞菌按接种量的5%接种到活化培养基中,在30°C光照下培养2天,离心得到活化培养物,取沉淀b,用质量比2:1将沉淀物a与沉淀物b混合,干燥、粉碎,过100目筛,收集混合筛分颗粒;

(5)采取步骤(2)按质量比2:1将混合液加入混合液中,然后按质量比1:6将去离子水加入混合液中,然后在70°C下混合35分钟,然后加入3倍于海藻酸钠质量的混合液,然后混合1小时,然后用6%氯化钙溶液将混合液加入混合液中,在27°C下滴加25分钟,35分钟。

?